ПЦР-диагностика гепатита С

Полимеразно-цепная реакция считается наиболее точным и современным методом выявления РНК и ДНК цепей любого характера. Вирусный гепатит С содержит рибонуклеиновую кислоту, а частое наличие ложно положительных результатов при проведении анти-HCV-анализа крови делает его идеальным кандидатом для проведения данного исследования.

Это хорошая идея обсудить ваши проблемы с медицинским работником или консультантом, который обучен, чтобы помочь вам справиться с гепатитом и другими. связанные с этим социальные проблемы, такие как. Если это произойдет, стоит поговорить с вашим врачом, поскольку многие консультанты готовы писать в ипотечную или страховую компанию с указанием вашего здоровья и ожидаемой продолжительности жизни. Кто должен сказать: это часто бывает трудным решением, но считайте, что положительный результат может повлиять на вашу семью и сексуального партнера, и должны ли эти люди также думать о тестировании.

Выделяют проведение качественного и количественного вида диагностики, из которых наиболее показательным является второй. Отрицательной стороной этого диагностического инструмента является его дороговизна, а так же длительность проведения исследования, в связи с чем HCV анализ крови является наиболее доступным, а при правильном его выполнении, количество ошибок является минимальным.

Особенности течения заболевания

Это первая из двух частей статьи о гепатите С. появится в следующем номере американского семейного врача. Гепатит С, вызванный вирусом гепатита С, является серьезной проблемой общественного здравоохранения в Соединенных Штатах. Все генотипы являются патогенными, и, по-видимому, нет никакой корреляции между генотипом и источником инфекции. Почему большинство пациентов постоянно заражаются?

Однако последовательные изменения в вирусном геноме приводят к вариантам, которые не распознаются существующими ранее антителами, которые обычно нейтрализуют или предотвращают инфекцию. Порождение этих белков-мутантов нейтрализации, по-видимому, является механизмом, с помощью которого вирус устанавливает и поддерживает постоянную инфекцию. Отсутствие эффективного ответа нейтрализующего антитела также означает, что естественная инфекция не защищает от реинфекции одинаковыми или разными генотипами вируса.

Клинические особенности и естественная история

По той же причине нет эффективной профилактики до или после постконтактной терапии. Только 15 процентов пациентов требуют госпитализации, а молниеносная болезнь встречается редко. Этот аспект гепатита С требует длительных последующих мер для обеспечения надлежащего диагноза и управления.

Прогресс хронического заболевания печени обычно коварный: он медленный и без симптомов или физических признаков у большинства пациентов в течение первых двух десятилетий после заражения. Часто хронический гепатит не распознается до появления симптомов развития прогрессирующей болезни печени.

ВГС анализ крови является лабораторным методом диагностики гепатита С, механизм его действия построен на идентификации антител типа Ig G и Ig M, которые начинают активно вырабатываться при появлении в крови антител вируса. Что это такое? Это патогенные микроорганизмы, появляющиеся спустя несколько недель или даже месяцев с момента инфицирования человека.

Количественные показатели: норма и превышение

Показатели РНК вируса гепатита С при количественном исследовании в норме демонстрируют полное отсутствие вируса. Если же врач замечает хотя бы минимальное его содержание в крови, речь идет о заражении. Варианты:

1. В норме полимеразная цепная реакция не должна превышать 400 МЕ/мл. Такой показатель означает, что концентрация вируса очень мала и человек вряд ли может заразить окружающих. Однако болезнь есть, поэтому необходимо проводить срочную терапию.
2. Если этот показатель выше 800 МЕ/мл, то речь идет о прогрессе болезни, хронической стадии ее развития. В таких случаях необходимо проводить максимально интенсивную лекарственную терапию, а иначе болезнь способна довести человека до летального исхода.
3. Если этот показатель превышает 1 млн/мл, то речь идет о критическом развитии гепатита С. Вероятность летального исхода в ближайший месяц составляет 80%.

Количественный анализ на гепатит С расшифровку имеет разную, все зависит от стадии заболевания, пола и возраста пациента. Например, у мужчин концентрация вируса может быть выше 400 МЕ/мл, но болезнь будет все еще пребывать на ранних стадиях развития.

Врачи предпочитают проводить такие исследование на 1, 4, 23 и 12 неделях лечения. Это необходимо для того, чтобы проследить эффективность применяемых методик. Например, если на первой неделе показатель был 800 МЕ/мл, а к 12-й он стал 300 МЕ/мл, значит, лечение оказалось эффективным и заболевание начало отступать.

Помимо методики ПЦР-исследования крови, которая считается довольно дорогостоящей, используются и иные:

• Применяется метод Р-ДНК, который стоит недорого, но имеет низкую чувствительность. Тут наличие вируса определяется лишь при его концентрации выше 500 МЕ/мл.
• Популярен и метод транскрипционной амплификации (ТМА), главное достоинство которого кроется в высокой чувствительности при минимальной стоимости. Благодаря такому методу определить вирус удается даже при концентрации от 5–10 МЕ/мл.

«Гепатит С» — серьезный диагноз, часто означающий, что пациент умрет в ближайшие 5–10 лет. Однако методика ПЦР-исследования крови помогает определить болезнь на самых ранних стадиях и с помощью медикаментозной терапии остановить ее развитие.

Гепатит С: вирус, симптомы, диагностика и лечение

Какие методы лечения гепатита C существуют?

Лечение гепатита C предусматривает различные методы, в зависимости от степени тяжести заболевания и индивидуальных особенностей пациента. Основными методами лечения гепатита C являются антивирусная терапия и поддерживающая терапия.

Антивирусная терапия направлена на уничтожение вируса гепатита C и предотвращение развития печеночной недостаточности. Она включает прием противовирусных препаратов, таких как ингибиторы протеазы, ингибиторы полимеразы и ингибиторы репликации вируса. Доктор может назначить комбинированную терапию, которая сочетает несколько препаратов для повышения эффективности лечения.

Поддерживающая терапия направлена на поддержание и укрепление иммунной системы пациента. Она включает прием препаратов, таких как иммуномодуляторы и гепатопротекторы. Также важным аспектом поддерживающей терапии является здоровый образ жизни, включающий правильное питание, физическую активность и отказ от вредных привычек, таких как употребление алкоголя и курение.

В некоторых случаях, при наличии осложнений или запущенной форме гепатита C, может потребоваться хирургическое вмешательство. Например, в случае цирроза печени может потребоваться трансплантация печени. Однако такие случаи являются крайней мерой и обычно применяются только в тяжелых случаях заболевания.

Важно отметить, что выбор метода лечения гепатита C должен производиться только врачом, исходя из индивидуальных особенностей пациента и степени тяжести заболевания. Самолечение может быть опасным и привести к нежелательным последствиям.

При подозрении на гепатит C рекомендуется обратиться за консультацией к врачу-гастроэнтерологу или гепатологу для проведения необходимых исследований и установления точного диагноза.

ПЦР диагностика

ПЦР – наиболее распространенный и точный метод определения вируса и его количественных возможностей. Метод способен определять вирусы в разных формах и диагностировать малоизвестные заболевания.

Анализ ПЦР (полимеразной цепной реакции) осуществляется путем забора крови и определения в ней вирусной РНК.

В образцы крови добавляются специфические ферменты и определяются в специальный реактор. Там происходит клонирование клеток.

Сначала одна клетка делится на две копии, потом каждая из копий делится еще на две. Таким образом, после синтеза копий появляются сотни клеток ДНК.

ДНК можно сравнить с базой информации о всевозможных возбудителях и выявить инфекцию на ранних сроках заболевания.

Преимущества ПЦР метода:

• многие методы диагностики выявляют только наличие вируса путем выделения в крови продуктов жизнедеятельности инфекционных микроорганизмов. Метод ПЦР напрямую указывает на возбудителя инфекции;
• специфика ПЦР заключается в том, что в исследуемой пробе крови выявляется уникальный фрагмент ДНК. Это исключает шанс на ложный результат;
• ПЦР способно выявить даже единичные клетки инфекции и диагностировать несколько возбудителей в одной пробе крови.

Качественный анализ

Помогает обнаружить вирус в крови. При положительном результате следует продолжить обследование и провести количественный анализ, который определит стадию болезни, и предоставит врачам возможность спланировать наиболее благоприятную тактику лечения. При проведении данного анализа допускаются только два заключения:

«Обнаружено». Свидетельствует о наличии вируса в крови. Подобный результат считается положительным. В крови уже выявлен РНК вируса, который уже начал развиваться, заражая здоровые клетки и поражая печень.

«Не обнаружено». Говорит о том, что в пробе крови отсутствуют РНК гепатита С. Также существуют случаи, что в исследуемом образце концентрация вируса ничтожно мала и не попадает в рамки чувствительности анализа. Стоит заметить, что анализ выявляет инфекцию на 10-й день после инфицирования, что дает возможность определить вирус еще до его существенных внешних проявлений.

Количественный анализ

Выявляет концентрацию генетического материала вируса в определенном объеме крови. Это не только дает возможность определить тяжесть болезни, но и позволяет увидеть полную клиническую картину заболевания (в том числе при лечении). В результате проведения данного анализа могут быть только 3 заключения:

Результат «Положительный». Результат в числовом показателе отражает вирусную нагрузку. Концентрация вируса определяет количество вируса в 1 миллилитре, что равно 1 кубическому сантиметру крови. Единицы измерения данного анализа МЕ/мл (международные принятые единицы на миллилитр). Если концентрация вирусных частиц меньше 8х10 000 МЕ/мл, то лечение эффективно, если же наоборот, то стоит изменить тактику лечения. Если вирусная нагрузка в течение первых недель терапии падает до 60 %, то эффективность лечения является высокой. Низкий уровень равен до 400 000 МЕ/мл, а высокий от 1 000 000 МЕ/мл. Вирусная нагрузка определяет степень заболевания и возможность его передачи. При высоком уровне концентрации вирусных клеток в крови риск передачи заболевания вертикальным или же половым путем достаточно велик.

Результат «Недействительный». Этот результат означает, что при качественном анализе вирус в организме был обнаружен, но количественный анализ не смог определить его концентрацию в крови. Такое происходит, когда количество частиц РНК вируса в крови ниже диапазона определения.

Результат «Не обнаружено». Расшифровка анализа означает отсутствие РНК клеток гепатита С в образце крови.

Количественный анализ ПРЦ проводится на всех стадиях болезни. Для выявления оптимального лечения анализы проводятся на сроках: (4-я, 12-я, 16-я, и 24-я неделя). Если по результатам наблюдается снижение вирусной нагрузки, то лечение можно считать эффективным. После завершения терапии количественный анализ проводится для обнаружения рецидива, то есть, обнаружения вируса после снижения его активности до минимума.

Расшифровка полученных данных

Расшифровка анализа может быть представлена словами (в случае качественного исследования), например, «не обнаружено» или «ниже диапазона изменений». В первом случае, это свидетельствует о том, что инфекция не обнаружена. Во втором – что вирус присутствует, но в незначительном количестве. Такая ситуация требует проведения повторного исследования.

Вирусная нагрузка определяется по количеству инфекционного РНК и обозначается как МЕ/мл или копии/мл.

Нормальным показателем (нормой) количественного анализа на гепатит C является диапазон от 1,8х102 до 2,4х107 МЕ/мл.

Концентрация вируса в крови может быть:

• низкой: от 600 МЕ/мл до 3х10 4 /мл;
• средней: от 3х10 4 МЕ/мл до 8х10 5 МЕ/мл;
• высокой: более 8х10 5 МЕ/мл.

Количественны и качественны анализ ПЦР на гепатит позволяет определить наличие вируса в организме и уровень его концентрации. Полиразмерная цепная реакция способна диагностировать заболевание на ранних стадиях, но для этого необходимо, чтобы больные как можно раньше обращались в медицинские учреждения за помощь и строго следовали рекомендациям лечащего врача.

Вирус гепатита С способен размножаться в клетках крови и вызывать лимфопролиферативные болезни. Благодаря множественным мутациям иммунная защита организма ослабевает, возникают генотипы и субтипы вируса. При правильном и своевременном определении конкретного вида зависит эффективность противовирусной терапии. Опасность инфицирования состоит в том, что болезнь протекает бессимптомно. Всего в 15 процентах из 100 могут наблюдаться тошнота и рвота, похудением и повышением температуры.

Что такое ПЦР

Техника проведения полимеразной цепной реакции известна достаточно давно и успешно используется для диагностирования ряда вирусных заболеваний, и HCV не является исключением.

В настоящее время существует несколько методик постановки ПЦР, но в принципиальном плане этот процесс состоит из нескольких этапов:

1. Разрушение двойной нити ДНК под воздействием нагревания либо определенных химических веществ.
2. Присоединение к разделенным основанием ДНК так называемых праймеров – остатков нуклеотидной цепи РНК вируса (в большинстве современных тест-систем используются 5`-NTR-области генома HCV).
3. Специфический фермент, ДНК-полимераза, распознает праймер, провоцирует присоединение других нуклеотидных остатков.

По окончании третьего этапа полимеразной цепной реакции ДНК между двумя праймерами удваивается, а впоследствии происходит амплификация участка генома в геометрической прогрессии (2–4–8 и т.д.).

Чувствительность современных тест систем составляет 10–50 копий РНК в 1 мл крови.

Расшифровка ПЦР на гепатит С должна проводиться квалифицированным специалистом. В соответствии с Международным стандартом ВОЗ для количественного определения вирусного генома служит образец плазмы крови в лиофилизированном виде, содержащий РНК первого генотипа вируса в концентрации 105 МЕ/мл.

При этом обращают внимание на количественные единицы, в которых выражены результаты исследований. Обычно количество копий РНК HCV указывают в абсолютном или логарифмическом выражении.

Затем, в соответствии с международными стандартами, эту цифру пересчитывают при помощи специального коэффициента в международные единицы (МЕ). Таким образом конечные результаты обозначаются в МЕ/мл.

Для проведения количественного исследования применяют различные тест-системы и методики постановки полимеразной цепной реакции. Некоторые предназначены для оценки уровня виремии в плазме или сыворотке. Другие более эффективны и показательны при исследовании цельной крови.

Говорить о норме при интерпретации указанных в лабораторном бланке результатов не совсем корректно. Дело в том, что у здорового человека РНК вируса в организме отсутствует, а наличие частиц HCV вне зависимости от количественного показателя свидетельствует об инфицировании. В дальнейшем при помощи ПЦР оценивают эффективность лечения. При отрицательном результате на 4 неделе приема медикаментов, а затем и после окончания противовирусной терапии (на протяжении 48 недель) говорят о выздоровлении.

Виды исследования

Проведение полимеразной цепной реакции предполагает определение не только наличия РНК HCV в крови, но и определение количества копий вируса и анализ структуры генома. Такие возможности делают ПЦР одним из наиболее информативных и точных методов диагностики вирусного гепатита C.

Все применяемые на практике методы постановки полимеразной цепной реакции приведены ниже в порядке проведения (каждый последующий тест назначают при положительном результате предыдущего):

1. Анализ ПЦР на гепатит С качественный, проводится только для обнаружения РНК вируса в крови.
2. Количественное исследование ПЦР. Расшифровка проводится согласно общепринятым нормам. В зависимости от результата вирусологическая нагрузка может быть низкой, умеренной или высокой. Данный показатель является одним из предикторов исхода терапии HCV.
3. Генотипирование (во многих частных лабораториях предлагается в комплексе с количественным анализом, что снижает общую стоимость). Обозначение генотипа HCV осуществляется одной из арабских цифр (с 1 по 6). На территории России чаще выявляют генотип 1 или 3, несколько реже – 2, 4–6 диагностируют в единичных случаях. Ранее при использовании интерфероновых схем лечения разновидность HCV определяла длительность и эффективность терапии. Современные противовирусные средства отличаются широким спектром действия, но некоторые из них прописывают только при 1–4 генотипах HCV.

Генотипирование проводится только один раз, перед началом терапии. По мере приема медикаментов количественные нормы гепатита С необходимы врачу для оценки эффективности противовирусных препаратов. После окончания курса лечения проводят качественное исследование ПЦР.

Важность частоты проведения исследования ПЦР

Во время протекания недуга на разных фазах доктор может назначать прохождение тестов ПЦР. Это мера дает возможность понять эффективность лечения и определить сроки его проведения в дальнейшем.

Если же ответы теста положительные, срок будет существенно сокращен, в обратном случае курс лечения нужно будет продлить.

Исходя из имеющейся практики, стоит отметить, что ПЦР принято проводить на 1 потом 4, а также 12 и 24 неделях лечебно-терапевтического курса.

Если на третьем тесте ПЦР показатели не изменились в пользу выздоровления, значит, курс нужно сменить. Выходит, что терапия не подошла организму.

Под результатом количественного теста стоит понимать оценку результатов, связанных с вынесением вердикта ниже измеряемых диапазонов или же могут быть такие пометки, как в крови не обнаружено.

Показатель чувствительности качественного анализа ниже, чем у его предшественника. Оба вида анализов с расшифровкой – отсутствующий, будут говорить о том, что вируса гепатита С не было найдено.

В тех случаях, когда анализы имеют отклонения, могут быть назначены дополнительные тесты. Чаще всего, это биопсия. Процедура позволит определить степень поражения органа печени.

Если изменения полученных анализов находятся вне нормы, значит, вирус продолжает расти и болезнь набирает обороты.

Повлиять на то, что появились сбои в результатах анализов, могут такие факторы, как:

• присутствие в материалах гепарина или же веществ, которые не дают ПЦР действовать в нормальном режиме;
• загрязнение образцов крови;
• ошибка лаборатории;
• тест был проведен с несоблюдением имеющихся норм.

Если результат отличается в разных лабораториях, то виной этого может стать иная методика в проведении исследований биологических материалов пациентов.

Симптомы заболевания

Нормальным, тое есть здоровым состоянием считается отсутствие каких-либо серьезных проявления недомогания. Опасность вируса гепатита состоит в том, что заболевание может не давать сильных симптомов. Явные признаки заболевания, (рвота, резкое похудение и пр.) проявляются только в 15% случаев. У остальных 85% больных симптомы проявляются достаточно слабо. Необходимо следить за своим самочувствием и реагировать на ухудшение состояния.

• Наиболее характерный признак проблем с печенью, это желтушность кожи и белка глаз. Эти признаки соответствуют не только вирусу гепатита, но и другим заболеваниям печени.
• Появление сосудистых звездочек на коже. Мелки капилляры, которые находятся у кожного покрова расширяются в результате присутствия вируса в крови, и появляются «звездочки».
• «Печеночные ладони» это симптом, который сопровождается покраснением ладоней, а иногда и стоп. Это явление также называется пальмарной эритемой и появляется обычно вместе с сосудистыми звездочками.
• Раздражающее токсическое воздействие вируса на организм может вызвать кожный зуд.
• Из-за изменения химического состава крови может быть нарушен показатель свертываемости.
• Длительное воздействие вируса на организм приводит к нарушению функций мозга (приобретенная энцефалопатия).
• Возможно появление внутренних кровотечений.
• Нарушения функций печени может привести к скоплению жидкости в брюшной полости (асцит).
• В конце дня на ногах больного появляются отеки.

Проявление одного или двух симптомов характерно для самых различных заболеваний. Чаще всего недомогание объясняется физической усталостью или сильной психологической нагрузкой и стрессом. При обнаружении нескольких характерных симптомов из представленного списка имеет смысл сделать количественный анализ на гепатит С.

Расшифровка результата анализа ПРЦ на гепатит С

При каждой лаборатории присутствует специально обученный сотрудник, занимающийся расшифровкой анализов. Именно в его компетенции находится выявление референсного значения. При этом каждая лаборатория использует различные реактивы и тест-системы. Именно поэтому количественный анализ может быть либо в МЕ/мл или копиях/мл. Но это не меняет сути.

Лаборант не занимается трактовкой данных – это функция врача-гепатолога. Он рассматривает не только данные представленного обследования. Если результат вызывает сомнение, специалист может назначить дополнительное обследования при помощи других методик.

Некоторые выводы больной может сделать самостоятельно, получив результаты на руки. Качественный тест с обозначением «обнаружено» или «не обнаружено» косвенно укажет на наличие заболевания.

Трактовка количественного показателя – привилегия врача. Тем более что среди врачей не существует единого мнения, какая вирусная нагрузка является средней, а какая – низкой. Существуют такие значения:

• от 0 до 15МЕ/мл – референсное значение (то есть пациент скорее здоров, чем болен);
• до 4 х 10*5 МЕ/мл – низкая вирусная нагрузка;
• от 4 х 10*5 МЕ/мл до 8 х 10*5 МЕ/мл – средняя вирусная нагрузка;
• свыше 8 х 10*5 МЕ/мл до 10 х 10*5 МЕ/мл – высокая вирусная нагрузка;
• более 10 х 10*5 МЕ/мл – очень высокая нагрузка, сопряженная с опасностью для жизни пациента.

Количественный показатель указывает на агрессивность вируса. То есть чем его больше, тем сильнее негативное воздействие, оказываемое им на печень, тем длительнее и сложение будет терапия.

Если пациент сомневается в результатах анализов, их следует пересдать по собственной инициативе.

Анализы ИФА на гепатит С

Эта методика основывается на обнаружении в венозной крови пациента, антител к вирусному гепатиту С. Их существует два типа:

• IgG – указывает на хроническое течение заболевания;
• IgM – указывает, что болезнь находится в острой стадии.

Отсутствие антител обозначает, что болезни нет. Но это не всегда верно. Вирус HVC умеет «скрываться» и «обманывать» иммунную систему человека. Поэтому при его попадании в организм не всегда тут же происходит адекватный иммунный ответ. Поэтому в случае сомнения анализ следует повторить через время.

Анализы riba на гепатит С

Не относится к первоначальному обследованию. Его чаще используют после ПРЦ или ИФА для подтверждения диагноза. RIBA обозначает рекомбинантный иммуноблотинг. Методика не позволяет точно определить генотип вируса, она указывает на его однозначное присутствие в организме.

Биохимический анализ крови для выявления гепатита С

Анализ крови на биохимические показатели – это важный этап предварительного обследования. Человеческая кровь выдает более 100 показателей. Их отклонение от референсного значения может указывать на следующие патологии:

1. Нарушение работы печени, почек, поджелудочной железы или желчного пузыря.
2. Сбой в обменных процессах.
3. Воспалительные процессы внутренних органов, тканях или суставах.

Биохимический анализ крови позволяет быстро выявить любые проблемы со здоровьем. Отклонение показателей от нормы точно указывает на возникшие заболевания и дает основание для дополнительных обследований.

Для определения возможных проблем с печенью исследуется следующие показатели:

Показатель	Возможная патология	Ед. измерения	Референсное значение
мужчины	женщины
Билирубин	Превышение верхней допустимой границы указывает на серьезные нарушения в работе печени и ее структурное изменение	Мкмоль/л	3,4-17,1	3,4-17,1
Альбумин белок, вырабатываемый печенью	Резкое снижение показателя свидетельствует о серьезном заболевании печени	г/л	35-50	35-50
Гамма-глобулин	г/л	130-160	120-150
Ферменты АлАт и АсАт	Любое отклонение выше верхнего референсного значения указывает на присутствие вирусного гепатита	Ед/л	41-45	31
Глюкоза	Понижение показателя обозначает серьезное нарушение метаболизма и отклонения в работе печени	Ммоль/л	3,30-5,50	3,30-5,50

Показатели нормы различаются не только по половой принадлежности, но и в зависимости от возраста пациента. В таблице указаны данные для взрослых пациентов до 60 лет.

Только врач способен расшифровать показатели. Некоторое отклонение от нормы не обязательно указывает на наличие гепатита С. Это может быть временный сбой в работе печени под воздействием других факторов.

Определение вируса гепатита С

Стандартная норма гепатита С – это размеры от 40 до 60 нм, с большинством липидов, поражение печени в результате острого или хронического течения болезни. Гепатит С, а именно РНК-вирус семейства Togaviridae, крайне стойкий, передается путем переливания крови или использования нестерильных предметов, неправильная гигиена ванных принадлежностей и др. Количественный анализ позволяет исследовать кровь и выявить генетическую структуру инфицируемого вируса.

Чтобы гепатит С и его генотипы были определены, проводят количественный анализ. В зависимости от анализатора могут определить три уровня заболеваемости РНК-вирусом.

Субтипы могут производить различные модификации, поэтому специфика и чувствительность анализатора должна быть на сто процентов. Помимо обнаружения болезни у пациента, необходимо определить степень его тяжести. Некоторые лаборатории не имеют полностью всех данных по расшифровкам РНК-вируса, есть вероятность ложноположительного ответа.

Нормальная, высокая и низкая ВН

Однозначного консенсуса о том, какая ВН считается высокой, а какая — низкой, пока не достигнуто. Однако есть общепринятое среднее значение, оно же «норма», равное 800 000 МЕ/мл. Вирусная нагрузка больше нормы считается высокой, а меньше — низкой.

В отличие от некоторых других инфекционных заболеваний, в случае с ВГ C нет зависимости между высокой ВН и выраженностью симптомов или степенью повреждения печени. Высокая вирусная нагрузка не свидетельствует о серьезности поражения печени или о степени развития фиброза (цирроза). Для получения этой информации используются другие методики, в частности, биопсия.

Для чего нужно определять ВН

Определение количества вируса считается важным анализом, особенно в некоторых ситуациях, когда требуется количественный анализ.

В первую очередь, анализ вирусной нагрузки выполняется перед тем, как начнется лечение, так как ВН является важным прогностическим индикатором того, насколько длительным и успешным будет лечение. Чем выше ВН, тем больше времени требуется для полной элиминации (выведения) вируса из организма. У пациентов с низким уровнем шансы на скорое полное излечение выше.

Кроме того, количественная оценка вирусной нагрузки используется у пациентов, кто находится в процессе противовирусной терапии.

После того, как подобрано подходящее лечение, изучение вирусной нагрузки при гепатите C может использоваться для контроля за успешностью терапии и для принятия дальнейших решений по тактике ведения пациента. Снижение уровня ВН в ходе лечения является индикатором успешности терапии.

Согласно современным рекомендациям, если по окончании запланированного курса противовирусной терапии интерфероном или его комбинации с рибавирином (обычно 24 или 48 недель) молекулы РНК не определяются, лечение считается успешно завершенным.

В дальнейшем измерение ВН может предупредить о развитии рецидива. В таком случае нужно выполнять качественный анализ уже пролеченным пациентам через 3 месяца, полгода и год. Хорошим результатом будет отсутствие определяемых молекул РНК. Появление положительных результатов свидетельствует о рецидиве заболевания.

Если количественный анализ дает отрицательный результат, это можно объяснить тем, что вирус полностью элиминирован (норма). Но это также может означать, что вируса меньше, чем в состоянии определить методика (обычно меньше 50 МЕ/мл). В такой ситуации имеет смысл выполнить качественный анализ для определения дальнейшей тактики лечения.

Вирусная нагрузка является важным диагностическим показателем для пациентов, получающих или готовящихся к противовирусной терапии. На основании этого теста можно спрогнозировать длительность лечения, а также контролировать его эффективность.

Стоимость пцр

ПЦР анализ, стоимость которого зависит от применяемых реактивов, и может составлять от 300 руб. до 5000 руб., выполняется от одних суток до недели.

Кроме метода ПЦР для выявления РНК ВГС также используется метод транскрипционной амплификации (ТМА), обладающий лучшей чувствительностью (порядка 5-10 МЕ/мл.), однако этот метод в России пока не распространен.

Как часто нужно делать ПЦР гепатита C? Обычно его проводят сразу после обнаружения антител к гепатиту C и после 4-й, 12-й, 24-й недели противовирусной терапии, а также через 24 недели после завершения ПВТ, а затем — ежегодно, в случае УВО.

Рис. 1. Пример результатов качественного ПЦР гепатита С.

Количественный анализ ПЦР (вирусная нагрузка) — это тест на концентрацию вируса (виремию) в  крови. Вирусная нагрузка — это количество единиц генетического материала (вирусной РНК), которая присутствует в определенном объеме крови (обычно это 1 мл, что соответствует 1 кубическому сантиметру). Это количество выражается в цифрах, единицы измерения МЕ/мл (международные единицы на миллилитр). Количество вируса может быть отображено по-разному. Например, 1,5 млн МЕ/мл, что соответствует 1.500.000 МЕ/мл или 1.5* 106 МЕ/мл. В некоторых лабораториях используются другие единицы измерения — копии/мл. Коэффициент пересчета из копий в международные единицы различный для разных тест-систем. Примерно значения можно пересчитать по формуле 1 МЕ/мл = 4 копии/мл, например, 5.5* 105 МЕ/мл = 2.2* 106 копий/мл.

Важно знать, что не существует прямой связи между концентрацией вируса в крови и тяжестью гепатита С.

На что же влияет вирусная нагрузка?

Во-первых, на инфекционность. Чем выше концентрация вируса, тем выше риск передать вирус, например, при половых контактах или вертикальным путем. Во-вторых, концентрация вируса влияет на эффективность лечения (если лечение будет проводиться на основе интерферона). Так, низкая вирусная нагрузка является благоприятным фактором при проведении терапии, а очень высокая – неблагоприятным. Также, количественный ПЦР имеет большое значение при проведении интерфероновой терапии для оценки ее успешности и планировании длительности курса. Так, при быстром ответе на лечение и низкой виремии перед терапией, сроки лечения могут быть сокращены. И, наоборот, при медленном снижении концентрации вируса, ПВТ может быть продлена.

Какая нагрузка считается низкой, а какая — высокой?

Высокой принято считать нагрузку свыше 800 *103 или 800.000 ME/мл, что примерно составляет 300*104 или 3.000.000 копий /мл. Нагрузка свыше 1*107 ME/мл считается очень высокой. Однако до сих пор среди специалистов нет общего мнения о значениях, разграничивающих высокую и низкую виремию. Так, в некоторых работах этой границей считается цифра 400.000 ME/мл.

Как часто нужно делать количественный тест?

Обычно его делают перед проведением терапии и после 12-й недели лечения для оценки ее эффективности в случае, если качественным тестом РНК еще определяется.

Результатом количественного теста может быть количественная оценка виремии в формате, описанном выше, а также результаты «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено».

Порог чувствительности количественного ПЦР обычно выше, чем качественного. Так, для системы COBAS AMPLICOR он составляет 600 ME/мл. Результат «не обнаружено» может означать, что количественный тест и подтверждающий качественный тест не обнаружил вирусную РНК. Результат «ниже диапазона измерений» означает, что количественный тест не выявил РНК гепатита С, но вирус присутствует в очень малой концентрации (в случае, если при этом был проведен дополнительный подтверждающий качественный тест).

Рис.2 Пример результатов количественного теста.